单精子注射技术是什么呢,很多人都不知道吧,其实就是我们所说的第二代试管婴儿技术,到底是怎么进行的呢,下面,我们就为大家详细介绍下精卵受精的过程。
第1步:显微注射系统较主要的仪器包括倒置显微镜和置于它两侧的显微操作仪。倒置显微镜的光学系统应具有三维立体视觉,对精子形态观察可以细致入微,辨别优劣。载物台配置37℃恒温垫板,以注射时卵子的温度恒定。操作仪的持卵侧容易控制,持卵针可自己拉制。持卵针的前端要平滑,内径要小,以免吸进卵细胞质。持卵针外径要比卵的直径略小为宜。
第2步:精子制动与注射持卵针和注射针分别安装到固定器上,持卵针和注射针要调至一个平面水平,左右呈一条直线。注射针的前端要与皿底平行。
第3步:将准备好的上游精子用拉制好的细玻璃管吸几个微升至培养皿中的PVP滴中,在20倍物镜下寻找形态正常、游动的精子,用注射针的前端贴培养皿底压住精子尾部中段,注射针对尾部施压摩擦至擦破尾部的质膜,然后先尾部后头部将精子缓慢吸入注射针前端。
第4步:无误地将质量好的精子吸入注射针前端,并能控制精子在前端移动速度至关重要,控制精子的移动要达到从PVP滴移到培养液小滴的过程中不丢失精子。
第5步:在低倍镜下将吸有精子的注射针以移动注射皿的方式进入放有卵子的培养滴,持卵针降下到皿底的培养液滴吸住卵子,将第二极体定位在7点的位置。
第6步:精子注射5至6小时后,可形成雌性和雄性原核。在临床的IVF中心,一般注射后第二天清晨检查受精情况。平均ICSI受精成功率应在80%以上,其中一个雌性原核一个雄性原核的2PN受精卵占总受精的90%左右;两个雌性原核(第二极体、未排卵)一个雄性原核的3PN受精卵时有发生,约占5%一10%,个别情况可达30%;l PN发生的情况约占5%。注射后第二天晨观察到的受精卵的两个原核应已经靠近,如果离的较远预示发育不良。
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